灭菌法（第1页）

灭菌法

灭菌法——是指用物理或化学方法杀灭全部微生物，包括致病的和非致病的微生物，以及细菌芽孢的过程，从而造成对活的。

即具有增殖能力的微生物（特别是细菌和真菌l勿使存活（无菌状态）的操作。

主要是杀死微生物，也包括用过滤等方法除去菌体的操作。

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热力灭菌法

利用高温，使微生物细胞内的一切蛋白质变性，酶活性消失，致使细胞死亡。

通常有干热、湿热和间歇加热灭菌等法。

①干热灭菌

直接利用火焰将微生物烧死。

不能用火焰灭菌的物品则利用热空气灭菌，将物品放在烘箱中加热到160～170℃，持续90分钟，此法适用于玻璃、金属和木质的器皿。

②湿热灭菌

以沸水、蒸气和蒸气加压灭菌。

巴氏灭菌法就是湿热灭菌，此法有两种方式，一是低温长时间处理，即在61．7～62．8℃下处理30分钟；二是高温短时间处理，在71．6℃或略高温度下处理15分钟。

以蒸气加压灭菌效果最好，可用常压蒸气灭菌，也可在高压蒸气锅中灭菌，其蒸气温度可达121℃，能将耐热的芽孢在30分钟内全部杀死。

但对某些易被高压破坏的物质，如某些糖或有机含氮化合物，宜在110℃灭菌15～30分钟。

③间歇加热灭菌

连续3天，每天进行一次蒸气灭菌的方法。

此法适用于不能耐100℃以上温度的物质和一些糖类或蛋白质类物质。

一般是在正常大气压下用蒸气灭菌1小时。

灭菌温度不超过100℃。

不致造成糖类等物质的破坏，而可将间歇培养期间萌发的孢子杀死，从而达到彻底灭菌的目的。

辐射灭菌法

在一定条件下利用射线进行灭菌的方法。

较常用的有紫外线，其他还有电离辐射。

波长在25000～80000纳米之间的激光也有强烈的杀菌能力，以波长26500纳米最有效。

辐射灭菌法仅限于某些材料，因所需设备复杂，难于广泛使用。

渗透压灭菌法

利用高渗透压溶液进行灭菌的方法。

在高浓度的食盐或糖溶液中细胞脱水，不能进行正常的新陈代谢，结果导致微生物的死亡。

化学试剂灭菌法

大多数化学药剂在低浓度下起抑菌作用，高浓度下起杀菌作用。

常用5％石炭酸、70％乙醇和乙二醇、1％氯化汞水溶液、3％～5％煤酚皂液、各种消毒肥皂液和某些气体（如环氧乙烷）等消毒剂的灭菌。